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48T人腫瘤壞死因子受體2檢測試劑盒實驗步驟
更新時間:2012-12-03   點擊次數(shù):1263次

 

 


上海信燃科技發(fā)展有限公司專業(yè)供應葡聚糖凝膠HL-20,白介素elisa試劑盒,腫瘤壞死因子elisa試劑盒,人類白介抗原B27,細胞生長因子試劑盒,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量100%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換

 

人腫瘤壞死因子受體2檢測試劑盒
試驗原理:
TNF-R2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知TNF-R2濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將TNF-R2和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中TNF-R2的濃度呈比例關(guān)系。


安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人腫瘤壞死因子受體2檢測試劑盒
操作注意事項
1. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7. 底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑的準備


人腫瘤壞死因子受體2檢測試劑盒
操作步驟
1. 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。


6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人腫瘤壞死因子受體2檢測試劑盒
結(jié) 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TNF-R2標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TNF-R2含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-8.0ng/ml

4、敏感度: 0.01 ng/ml

Adamantanecarboxylic Acid 1-金剛烷甲酸 [828-51-3] 100g
1-Adamantanol 1-溴金剛烷醇 [768-95-6] 100g
2-Adamantanol 2-金剛烷醇 [700-57-2] 100g
2-Adamantanone 2-金剛烷酮 [700-58-3] 100g
1-Adamantylamine hydrochloride 鹽酸金剛烷胺 [665-66-7] 100g
Adenine 腺嘌呤 [73-24-5] 25g
Agarose N 瓊脂糖N [9012-36-6] 50g
Agarose N 瓊脂糖N [9012-36-6] 250g
L-Alaninamide Hydrochloride L-丙氨酰胺鹽酸鹽 [33208-99-0] 100g
Adenine 腺嘌呤 [73-24-5] 100g
Adenine phosphate salt 腺嘌呤磷酸鹽 [70700-30-0] 5g
Adenine sulfate 腺嘌呤硫酸鹽 [321-30-2] 25g
Adenine sulfate 腺嘌呤硫酸鹽 [321-30-2] 100g
Adenosine 腺嘌呤核苷 [58-61-7] 5g
Adenosine 腺嘌呤核苷 [58-61-7] 25g
Adenosine 腺嘌呤核苷 [58-61-7] 100g
Adenosine-3',5'-cyclic monophosphate 腺苷3',5’環(huán)磷酸 [37839-81-9] 100mg
Adenosine deaminase 15U/mg 腺苷脫氨酶 [9026-93-1] 250U
ADP;Adenosine-5’-diphosphate, disodium salt 5’-二磷酸腺苷二鈉鹽 [16178-48-6] 1g
AMP;Adenosine-5’-monophosphate, free acid 5’-單磷酸腺苷 [18422-05-4] 5g
AMP;Adenosine-5’-monophosphate, free acid 5’-單磷酸腺苷 [18422-05-4] 25g
AMP disodium, hexahydrate ;Adenosine-5’-monophosphate, disodium, hexahydrate 5’-單磷酸腺苷二鈉鹽六水 [4578-31-8] 5g


若需要了解試劑盒的詳細信息,請:地址:上海市莘浜路35弄1號501室
:200070
:謝
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