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人ELISA試劑盒的相應(yīng)的解決辦法
更新時間:2015-07-10   點擊次數(shù):3435次

    人ELISA試劑盒試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,人ELISA試劑盒有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。

 1 選擇試劑 選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。

 2 加樣 可能原因:

 1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;

 2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);

 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。

 解決辦法:

 1)標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,人ELISA試劑盒采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

 2)加樣后及時放入孵箱。

 3)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

 4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

 5) 標本較多時,請分批操作。

 3 孵育 可能原因:

 1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;

 2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。 

解決辦法:

 1) 貼封片或加蓋;

 2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。

4 洗板 可能原因:

 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。

 2) 采用半自動洗板機洗板時,人ELISA試劑盒洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。

 3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 

上海通蔚生物科技有限公司

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