血清是一種成分復雜的混合物,且對細胞成長具有促進作用,我們培育細胞離不開血清。那在大規(guī)模細胞培育中由血清引起的細胞成長狀況不佳及病毒滴度的影響都有哪些體現(xiàn)?
一、細胞成長速度緩慢,長滿單層時刻長;從同一細胞瓶中分出兩瓶細胞,用同一種培育液,別離加入10%的對照血清和待檢血清,在相同條件下培育72小時,會呈現(xiàn)對照血清長滿單層,而待檢血清大約只有60~70%,這種血清就不合適用來大規(guī)模培育細胞。
二、細胞傳代后形狀不正常,細胞狀況發(fā)生變化 ;因為血清的質量問題,使本來狀況正常的細胞經傳代后形狀會變差;
比方:細胞瓶里會呈現(xiàn)一些活動的小黑點(并非污染),或許細胞表面形成一層油狀掩蓋物;細胞的概括變得模糊,細胞之間的空隙被血清中的蛋白顆粒填充,從而影響細胞向四周擴展成長。
三、細胞傳幾代后就呈現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,不能連續(xù)傳代 ;質量較差的血清缺乏某種細胞的貼壁因子,會使細胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的才能。細胞會從正常的貼壁狀況,邊緣開端縮小,上翹。觀察到的現(xiàn)象便是細胞表面不光滑,晃動細胞瓶會看到細胞表面有絮狀物隨培育液動搖。跟著傳代次數(shù)添加,細胞縮小的狀況越來越嚴峻,直到終*脫壁而死亡。
四、細胞長的很好,細密的單層,狀況也很正常,但是接毒后細胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測簡直測不出抗原滴度。這種狀況也許是因為 血清中含有與接種的病毒有同源的特異性抗體。
五、細胞成長的狀況一般,產毒少,毒價低。這種狀況比較常見,細胞是病毒的載體,因為血清質量欠好,導致細胞成長狀況欠好,病毒就無法進行正常的仿制。并非病毒都不能仿制,所以就形成疫苗的效價不行,可能形成不合格產品。
比方血清中經常會存在乙腦抗體,牛腹瀉病毒抗體等,如果存在這些抗體,就會把接進去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高,病毒會被抗體*中和,就沒病毒顆粒在細胞中增殖,所以會檢測不到病毒滴度。
這種狀況給疫苗企業(yè)形成的損失是相當大的,不產毒等于前面所做的那么多作業(yè)悉數(shù)白費,糟ta人力、物力,尤其是時刻上的糟ta,從培育細胞開端到接病毒,到收液至少需求一兩個月,一旦呈現(xiàn)不產毒的狀況,那么這一兩月時刻就白白糟ta掉了,這也是牛血清給疫苗企業(yè)形成的風險之一。
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