更新時(shí)間:2021-07-05
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檢測(cè)原理
☆ 本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法,所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。
☆ 預(yù)先包被的抗體為單克隆抗體,檢測(cè)相抗體為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。
☆ 樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。
☆ 隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng),經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。
☆ TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。
☆ 顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān)。
檢測(cè)原理示意圖如下:
大鼠抗凝血酶ⅢELISA檢測(cè)試劑盒樣本的稀釋
① 樣本稀釋倍數(shù)的確定:
本試劑盒可檢測(cè)SOD抑制率范圍在10%-50%之間,抑制率范圍25%-45%。
SOD抑制率(%)=((A對(duì)照-A對(duì)照空白)-(A測(cè)定-A對(duì)照空白))/(A對(duì)照-A對(duì)照空白)× 100% =(A對(duì)照-A測(cè)定)/(A對(duì)照-A對(duì)照空白)× 100%
② 樣本稀釋倍數(shù)的選擇:
在正式檢測(cè)前,需選擇2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本稀釋成不同濃度,按操作表進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),確定稀釋倍數(shù)。
③ 樣本稀釋倍數(shù)的調(diào)整:
若SOD抑制率大于50%,需將樣本稀釋后再測(cè)試;若SOD抑制率小于10%,減小稀釋倍數(shù)后再測(cè)試。
注:稀釋液為PBS(0.01 M,pH 7.4)。
儲(chǔ)存方法:
可以存儲(chǔ)在2 - 8°C長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月(專(zhuān)家建議:4°C恒溫保存,酶免試劑盒實(shí)驗(yàn)效果更佳)。對(duì)于長(zhǎng)期存儲(chǔ),請(qǐng)?jiān)?20°C的存儲(chǔ),盡量保持試驗(yàn)板在密封鋁箔袋,避免潮濕。
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要,比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求,而量身定制檢測(cè)試劑盒,有效控制試劑盒成本,并可提供免費(fèi)代測(cè)。
大鼠抗凝血酶ⅢELISA檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm波長(zhǎng)濾光片)。
2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL。
3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水。
4. 吸水紙。
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