每種試劑都有其反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應加蓋。
作為記錄測定結(jié)果的儀器,酶標儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養(yǎng),對濾光片要定期校正;其次酶標儀波長設置要正確,使用雙波長,一個檢測波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,ELISA試劑盒在用酶標儀讀數(shù)時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標儀性能有所不同,使用中應詳細閱讀說明書
綜上所述,盡管目前上以及我國有了部分標準血清或參比血清(血清盤),但是酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)目前在技術(shù)上尚未做到標準化。受方法學及技術(shù)條件的限制,在酶聯(lián)免疫吸附測定中有時不可避免的會出現(xiàn)一定的非特異性,ELISA試劑盒我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底,從而提高檢測的特異性,并得到更準確、可靠的實驗結(jié)果。
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